• laboratórium-217043_1280

Metóda odstraňovania zvyškov buniek

Po mechanickej lýze bunkovej suspenzie existuje veľa bunkových fragmentov.Ako odstrániť tieto fragmenty?Pozrime sa na rôzne prístupy:

1. Použite metódu riedenia.Keď sa bunky zriedia, môžu sa tiež množiť, budú čoraz početnejšie a bunkový odpad bude zodpovedajúcim spôsobom menej a menej.
2. Je tu aj prirodzené osídlenie.Bunky sa usadzujú rýchlejšie ako väčšina fragmentov: : Presuňte bunkovú suspenziu docentrifugačná skúmavkaa keď väčšina buniek klesne, horný roztok sa môže odsať a potom pridať do kultivačného roztoku, aby sa bunky suspendovali.Túto metódu je možné použiť opakovane, pričom zakaždým môžete pod mikroskopom pozorovať, či spĺňa vaše požiadavky.
3. Nízkorýchlostná odstredivkadokáže odstrániť nečistoty, zvyčajne 700 g, 5 minút
4. Pri odstreďovaníza podmienky, že počet buniek je dostatočný, znížte čas odstreďovania, napríklad 5 minút, 1000 ot./min, namiesto 3 minút, 1000 ot./min., a odstráňte supernatant, pretože v supernatante sú zvyčajne nekrózy a zvyšky!Túto operáciu je potrebné vykonať iba raz počas procesu umývania pred inkubáciou!

Hoci existuje mnoho spôsobov, ako odstrániť zvyšky buniek, zistíte, že centrifugácia je jednou z najúčinnejších metód!

450

A pretože rastlinné tkanivá a bunky majú bunkové steny zložené z celulózy, hemicelulózy a pektínu, na dosiahnutie účelu je vo všeobecnosti potrebné rozdrviť kremenný piesok alebo sklenený prášok s vhodným extrakčným roztokom alebo ošetriť celulázou.Fragmentácia bakteriálnych buniek je náročnejšia, pretože celý skelet bakteriálnej bunkovej steny je vlastne kovalentná väzba peptidoglykánových cystických makromolekúl, veľmi húževnatá.Bežné metódy rozbíjania bakteriálnych bunkových stien zahŕňajú ultrazvukové drvenie, pieskové mletie, vysokotlakovú extrúziu alebo ošetrenie lyzozýmom.Po rozbití tkaniva a buniek sa vyberie vhodný pufor na extrakciu požadovaného proteínu.Nerozpustné materiály, ako sú bunkové fragmenty, sú odstránené pomocoucentrifúgaalebo filtrácia.

kontaktujte prosím Whatsapp & Wechat: +86 180 8048 1709


Čas odoslania: 24. júla 2023